ABIPrism 7900型熒光定量PCR儀7900HT型熒光定量PCR儀是ABI公司最新推出的高通量實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)。它兼容96孔板，384孔板和Taqman低密度表達(dá)譜芯片，可以選用手工進(jìn)樣或通過自動進(jìn)樣裝置連續(xù)進(jìn)樣。7900HT型熒光定量PCR儀可滿足從中通量到高通量的基因表達(dá)定量和SNP多態(tài)性實(shí)驗(yàn)的需求。 7900HT型熒光定量PCR儀的主要特點(diǎn)高通量實(shí)驗(yàn)平臺7900HT型熒光定量PCR儀是為支持高通量實(shí)驗(yàn)而構(gòu)建的，激光光源，獨(dú)特設(shè)計(jì)優(yōu)化的光學(xué)系統(tǒng)適用于384孔板熒光信號的激活和實(shí)時檢測，可選配的自動進(jìn)樣裝置可以連續(xù)進(jìn)樣檢測84塊384孔反應(yīng)板，每天24小時可以連續(xù)自動進(jìn)行5000個反應(yīng)的基因表達(dá)定量分析或每小時進(jìn)行10000個SNP多態(tài)性終點(diǎn)檢測分析?？焖俣縋CR檢測世界上唯一的一臺可以按照標(biāo)準(zhǔn)96孔模式進(jìn)行快速定量PCR反應(yīng)的定量PCR儀。獨(dú)有的快速定量PCR反應(yīng)模式可以在35分鐘內(nèi)完成96個樣品20ul反應(yīng)體系的定量PCR檢測。反應(yīng)結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)模式相當(dāng)。中高通量切換簡便用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)規(guī)模需要，通過簡單地更換96孔或384孔的反應(yīng)基座，實(shí)現(xiàn)反應(yīng)體系的切換。96孔板為常規(guī)實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)配置，通用性強(qiáng)。384孔板通過減少反應(yīng)體積，增加樣品數(shù)既提高了反應(yīng)通量，又減少了試劑消耗，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。自動進(jìn)樣裝置和樣品追蹤7900HT型熒光定量PCR儀配備有自動化配件可取得最高效率。自動化裝置可容納84塊384孔板，實(shí)現(xiàn)連續(xù)自動檢測，機(jī)械手臂可按一定順序?qū)⒋郎y樣品板運(yùn)送至主機(jī)內(nèi)，配備的條形碼閱讀器（Barcodereader）可自動識別進(jìn)入主機(jī)的樣品板編號，實(shí)現(xiàn)樣品和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的自動追蹤，使您在可以任何時間在樣品行列中插入取出或更換樣品板。先進(jìn)的熒光檢測技術(shù)基于先進(jìn)的熒光檢測技術(shù)7900HT型熒光定量PCR系統(tǒng)在不降低速度、分辨率的情況下有效提高了產(chǎn)率。唯一在定量PCR儀上配置的長壽命氬離子激光逐行掃描并激活384個孔的每一個孔里的熒光染料，熒光信號通過光柵分光，經(jīng)過分離的多色熒光同時到達(dá)可見光連續(xù)波長掃描的CCD攝像機(jī)，實(shí)現(xiàn)所有反應(yīng)樣品，多色熒光的同時檢測。多樣的化學(xué)試劑7900HT型熒光定量PCR儀上可使用的熒光定量方法包括TaqMan熒光探針法和SYBRGreen熒光染料法。除了通用試劑盒外，對于研究人、大鼠、小鼠基因組的客戶，ABI公司現(xiàn)在可以根據(jù)用戶的需要提供約十二萬種基因表達(dá)引物、探針和兩百多萬種SNP分析的引物探針進(jìn)行科學(xué)研究，極大地節(jié)省了設(shè)計(jì)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)的時間、精力和費(fèi)用。特殊要求的用戶還可以利用儀器配套的PrimerExpress軟件，設(shè)計(jì)合成特定的引物和探針，或者通過訂購CustomAssay的引物探針，配合通用的試劑盒進(jìn)行科學(xué)研究。Taqman低密度表達(dá)譜芯片根據(jù)用戶要求在反應(yīng)板中固化不同基因的檢測探針和引物，可同時檢測1個標(biāo)本的384個不同的基因或8個標(biāo)本的48個不同的基因，2ul微量反應(yīng)體積，節(jié)省試劑十倍以上，簡化實(shí)驗(yàn)操作，適用于中高通量的基因表達(dá)研究。是芯片實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)驗(yàn)證，完整生化通路基因表達(dá)研究的最佳可行方案。多種定量方法7900HT型熒光定量PCR儀為基因表達(dá)提供了兩種定量方法。絕對定量方法是依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線直接測定未知樣品目標(biāo)靶基因的量。相對定量方法是通過不同樣品靶基因表達(dá)量的相互比較確定靶基因在不同樣本中表達(dá)量的差異。絕對定量為了測定未知樣品中的靶基因的量，7900HT型熒光定量PCR儀可用來測定樣品的Ct值，然后依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線來測定待測樣品中靶基因的起始拷貝數(shù)。在標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制中，7900HT型熒光定量PCR儀軟件首先用已知的起始拷貝數(shù)的幾種稀釋度計(jì)算它們的CT值。接著，軟件使用測得的CT值對應(yīng)于起始拷貝數(shù)的對數(shù)值作圖。線性范圍可達(dá)九個數(shù)量級。相對定量對于大多數(shù)基因表達(dá)研究來說，相對定量是理想的方法。這種方法不是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線而是未知樣本相對于標(biāo)準(zhǔn)樣品的表達(dá)量差異計(jì)算靶基因的表達(dá)水平。用一個標(biāo)樣對照來標(biāo)定未知樣品的基因表達(dá)量。7900HT配套的相對定量軟件可以同時對不同批次的10塊PCR反應(yīng)板的數(shù)據(jù)同時進(jìn)行比較分析，實(shí)現(xiàn)高效、高通量的基因表達(dá)研究。有效的SNP檢測手段（終點(diǎn)分析）除實(shí)時定量檢測以外，7900HT型熒光定量PCR儀包括對于已知的單一核苷酸多態(tài)性（SNP）作大規(guī)模篩選的軟件。在一對等位基因系統(tǒng)中，用對應(yīng)于兩個等位基因的兩個MGB探針在同一個試管中做多重PCR反應(yīng)。反應(yīng)終止時所產(chǎn)生的熒光用7900HT型熒光定量PCR儀進(jìn)行測定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過分析軟件迅速取得。軟件功能強(qiáng)大，界面友好易操作數(shù)據(jù)分析和處理軟件可以進(jìn)行絕對定量、相對定量、SNP多態(tài)性和熔點(diǎn)曲線分析。軟件包括樣品表的設(shè)定、PCR循環(huán)條件設(shè)定以及結(jié)果分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后數(shù)據(jù)就可以進(jìn)行分析并顯示結(jié)果，包括樣品表的設(shè)定、原始光譜圖、定量結(jié)果表格以及擴(kuò)增曲線。引物探針設(shè)計(jì)軟件儀器配套的Primerexpress引物探針設(shè)計(jì)軟件可以方便簡單的根據(jù)模板序列系統(tǒng)化設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物和Taqman或MGB探針，并對設(shè)計(jì)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量評估，幫助用戶選擇最好的引物和探針。配合國內(nèi)代客合成和ABI通用的定量PCR試劑盒可以方便地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。